【摘要】研究Cdc42在破骨细胞分化成熟过程中的作用及分子机制。采用慢病毒干扰技术构建Cdc42沉默的RAW264.7细胞株,经嘌呤霉素筛选出稳转株。利用荧光定量PCR与Western blot检测其沉默效率。采用TRAP染色观察细胞分化能力。利用激光共聚焦显微镜观察Cdc42沉默经微丝和微管对细胞伪足形成的影响。利用荧光定量PCR与Western blot检测TRAP、PAK4、Cofilin转录和蛋白表达水平。与对照组比较,Cdc42沉默组Cdc42基因的转录极显著下降,蛋白表达水平显著下调,基因沉默效率在50%以上。TRAP阳性破骨细胞数量也急剧减少,细胞呈圆形。丝状伪足和板状伪足减少,TRAP、PAK4、Cofilin转录水平极显著下降,关键蛋白PAK4和Cofilin蛋白表达显著或极显著下调。Cdc42可通过调控细胞骨架蛋白,经丝状伪足和板状伪足,影响破骨细胞的分化。
【关键词】
《建筑知识》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《中外医疗》 2015-07-06
《阅江学刊》 2015-07-02
《重庆高教研究》 2015-06-30
《重庆高教研究》 2015-06-30
Copyright © 2013-2016 ZJHJ Corporation,All Rights Reserved
发表评论
登录后发表评论 (已发布 0条)点亮你的头像 秀出你的观点